Amfolyty se používají k vytvoření gradientu pH v kapiláře a proteiny, které mají být separovány, migrují (nebo jsou fokusovány) skrz amfolytové médium, dokud se neztratí na svém pI hodnoty.
Proč se v IEF používají amfolyty?
V IEF amfolyty cestují podle svého náboje pod vlivem elektrického pole za přítomnosti gradientu pH, dokud není čistý náboj molekuly nulový (např. izoelektrický bod, pI). … I ty nejjednodušší amfolyty (např. aminokyseliny) mohou vytvořit gradient pH a působit jako izoelektrický pufr.
Proč je izoelektrický bod důležitý?
Izoelektrický bod je významný při čištění proteinů, protože představuje pH, kde je rozpustnost typicky minimální. … Tento polymer má jedinečné vlastnosti, které zajistí, že proteiny vytvoří gradient pH, když na roztok aplikujete elektrické pole.
Jak amfolyty vytvářejí gradient pH?
V CIEF se vytváří heterogenní gradient pH uvnitř kapiláry přivedením napětí na nosné amfolyty Šířka gradientu pH závisí na tom, která série amfolytů je vybrána. Amfolyty jsou komerčně dostupné pro pokrytí širokého i úzkého rozmezí pH, jak je znázorněno na obrázku 5.2.
Co je chemie amfolytů?
Amfolyty jsou sloučeniny, které po rozpuštění ve vodě (což je sama o sobě amfoterní sloučenina) mohou působit buď jako kyselina, nebo jako báze.
