Obsah:
- Následuje přehled různých kroků protokolu nepřímého imunofluorescenčního barvení
- Jak provádíte imunofluorescenci?
- Jak používáte imunofluorescenci v buňce?
- Jaký je příklad imunofluorescence?
- Jaké je použití imunofluorescenčního barvení?
Video: Jak provést imunofluorescenci?
2024 Autor: Fiona Howard | [email protected]. Naposledy změněno: 2024-01-10 06:35
Následuje přehled různých kroků protokolu nepřímého imunofluorescenčního barvení
- Plánování experimentů a příprava vzorků. …
- Upevnění vzorku. …
- Celková permeabilizace. …
- Blokování. …
- Inkubace primárních protilátek. …
- Inkubace sekundární protilátky. …
- Kontrastní barva a montáž.
Jak provádíte imunofluorescenci?
Všechny inkubační kroky probíhají při pokojové teplotě
- Dvakrát omyjte buňky a pomocí pinzety opatrně umístěte krycí sklíčko s buňkami obrácenými vzhůru do zvlhčené komůrky.
- Zafixujte 4% formaldehydem po dobu 10 minut a vyperte 3×.
- Permeabilizujte 0,1 % TX-100/PBS po dobu 15–20 minut a promyjte 3×.
Jak používáte imunofluorescenci v buňce?
Imunofluorescenční protokol pro adherentní buňky
- Nasaďte 1–1,5 x104 buněk na jamku 4komorového sklíčka v 500 ml kultivačního média. Inkubujte při 37 °C a 5 % CO2.
- 32–36 hodin po naočkování buněk odstraňte médium pro kultivaci buněk a opláchněte buňky 3krát pomocí 500 µl 1X PBS.
Jaký je příklad imunofluorescence?
Výzkumník může například vytvořit primární protilátky u kozy, které rozpoznávají několik antigenů, a poté použít na barvivo navázané králičí sekundární protilátky, které rozpoznávají konstantní oblast kozí protilátky („ králičí anti-kozí protilátky).
Jaké je použití imunofluorescenčního barvení?
Imunofluorescenční (IF) barvení je široce používaná technika v biologickém výzkumu a klinické diagnostice IF využívá fluorescenčně značené protilátky k detekci specifických cílových antigenů. Následuje zobrazování, je to velmi přímá technika, protože můžete skutečně něco vidět.
Doporučuje:
Jak provést flebektomii?
Vytvářejí se v kůži vedle rozšířené žíly. Lékař zavede flebektomický háček pod povrch kůže a drobným řezem odstraní křečovou žílu. Tento postup obvykle trvá od 30 minut do jedné hodiny . Jak se provádí ambulantní flebektomie? Ambulantní flebektomie (také nazývaná mikroincizní flebektomie, háčková flebektomie, bodná avulzní flebektomie a mikroflebektomie) zahrnuje odstranění částí křečových žil pomocí malých řezů pomocí háčku Obvykle je to prováděno v ordinaci lékaře
Jak provést proces intubace?
Ústa pacienta jsou jemně otevřena a pomocí osvětleného nástroje, aby jazyk nepřekážel a aby se zapálilo hrdlo, je hadička jemně vedena do hrdla a vysunuta do dýchacích cest. Kolem trubice je malý balónek, který je nafouknutý, aby trubici držel na místě a zabránil úniku vzduchu .
Jak provést zkušební modlitbu?
Zkouška: Denní modlitba Díkůvzdání. Za co jsem v uplynulém dni obzvláště vděčný… … Petice. Chystám se zhodnotit svůj den; Žádám o světlo, abych poznal Boha a poznal sám sebe tak, jak mě Bůh vidí. Recenze. Kde jsem dnes cítil opravdovou radost?
Jak provést vlajkování na zahradě?
Zde je návod, jak položit terasu pro začátečníky v 6 snadných krocích Zakopejte 150 mm do oblasti vaší terasy. Položte zhutněný podklad o tloušťce 100 mm. Pokryjte oblast 40 mm betonové směsi. Položte dlažební desky 15 mm do betonu s mezerou 10-15 mm.
Jak snížit barvení pozadí při imunofluorescenci?
Pro snížení vazby nespecifických protilátek a v důsledku toho snížení signálu pozadí se doporučuje použít blokovací roztok před inkubací s protilátkami Nejúčinnější blokovací roztok bude být to, které obsahuje sérum ze stejného druhu, ve kterém byla vypěstována sekundární protilátka .