Logo cs.boatexistence.com

Jak provést imunofluorescenci?

Obsah:

Jak provést imunofluorescenci?
Jak provést imunofluorescenci?

Video: Jak provést imunofluorescenci?

Video: Jak provést imunofluorescenci?
Video: Small Fiber Neuropathies- Kamal Chemali, MD 2024, Smět
Anonim

Následuje přehled různých kroků protokolu nepřímého imunofluorescenčního barvení

  1. Plánování experimentů a příprava vzorků. …
  2. Upevnění vzorku. …
  3. Celková permeabilizace. …
  4. Blokování. …
  5. Inkubace primárních protilátek. …
  6. Inkubace sekundární protilátky. …
  7. Kontrastní barva a montáž.

Jak provádíte imunofluorescenci?

Všechny inkubační kroky probíhají při pokojové teplotě

  1. Dvakrát omyjte buňky a pomocí pinzety opatrně umístěte krycí sklíčko s buňkami obrácenými vzhůru do zvlhčené komůrky.
  2. Zafixujte 4% formaldehydem po dobu 10 minut a vyperte 3×.
  3. Permeabilizujte 0,1 % TX-100/PBS po dobu 15–20 minut a promyjte 3×.

Jak používáte imunofluorescenci v buňce?

Imunofluorescenční protokol pro adherentní buňky

  1. Nasaďte 1–1,5 x104 buněk na jamku 4komorového sklíčka v 500 ml kultivačního média. Inkubujte při 37 °C a 5 % CO2.
  2. 32–36 hodin po naočkování buněk odstraňte médium pro kultivaci buněk a opláchněte buňky 3krát pomocí 500 µl 1X PBS.

Jaký je příklad imunofluorescence?

Výzkumník může například vytvořit primární protilátky u kozy, které rozpoznávají několik antigenů, a poté použít na barvivo navázané králičí sekundární protilátky, které rozpoznávají konstantní oblast kozí protilátky („ králičí anti-kozí protilátky).

Jaké je použití imunofluorescenčního barvení?

Imunofluorescenční (IF) barvení je široce používaná technika v biologickém výzkumu a klinické diagnostice IF využívá fluorescenčně značené protilátky k detekci specifických cílových antigenů. Následuje zobrazování, je to velmi přímá technika, protože můžete skutečně něco vidět.

Doporučuje: