Člověk může zmrazit a rozmrazit RIPA pufr 2-3krát, aniž by ztratil svou účinnost, pokud je během používání uložen na ledu (20-30 minut). Uchovávejte pufr zmrazený při -80 °C.
Jak dlouho si mohu ponechat RIPA buffer?
1. Pokud se bude pufr používat nepřetržitě, doporučuje se, aby byl 10x pufr uchováván při teplotě 4 °C po dobu 1-2 týdnů. Po delší dobu by měl být pufr skladován při -20 °C. Pokud má být provedeno mnoho malých experimentů, doporučuje se alikvotovat 10x pufr.
Lze vyrovnávací paměť RIPA uložit na?
Připravený RIPA pufr by měl být rozdělen do alikvotů a skladován při −20°C. Před okamžitým použitím přidejte do rozmraženého alikvotu inhibitory proteázy a/nebo fosfatázy. Jeden mililitr pufru stačí k lýze přibližně 5 milionů buněk. …
Jak skladujete RIPA lyzáty?
Připravené lyzáty použijte co nejrychleji a skladujte je co nejkratší dobu. Skladujte lyzáty při teplotě -80 °C tak dlouho, jak je to možné. V případě lyzátů, které bude třeba dlouhodobě uchovávat, přeneste čerstvě připravené zkumavky do dostupného mrazáku -80 °C, abyste zabránili degradaci.
Jak rozmrazujete pufr RIPA?
Po odstranění konečného promývacího roztoku z buněk přidejte do buněčné pelety vhodný objem pufru RIPA (1 ml na 0,5 až 5 × 107 buněk) a krátce promíchejte nebo vortexujte, aby se buňky úplně resuspendovaly. Inkubujte na ledu nebo v chladničce (2–8 °C) po dobu pěti minut.
