Vortexování neodstřihne vaši RNA, aby byla nepoužitelná, pokud provádíte náhodné priming RT – pouze pokud chcete klonovat dlouhou mRNA. Technická podpora Invitrogen je také správná. Chloroform je těžší než Trizol a klesne na dno zkumavky.
Je bezpečné vortexovat RNA?
Vortexujte lyzáty Trizol nebo vzorky RNA, aby nedošlo ke smyku. Po extrakci uchovávejte vzorky RNA po celou dobu na ledu. Tento protokol je určen pro vzorky lyžované 1 ml Trizolu v 1,5 nebo 2 ml zkumavce.
Můžete zahřát RNA?
Vyhněte se proto vysokým teplotám ( nad +65°C), protože ovlivňují integritu RNA. Místo toho pro roztavení sekundárních struktur zahřejte RNA na +65 °C po dobu 15 minut v přítomnosti denaturačních pufrů.
Jak resuspendujete pelety RNA?
rozsuspendujte peletu teplou vodou (40-50 °C). inkubujte při 45 °C po dobu 10 minut. vložte je do +4 na 4–6 hodin.
Jak vysrážíte RNA?
A.
Po úpravě koncentrace soli lze RNA vysrážet přidáním 2,5 objemu ethanolu nebo 1 objemu isopropanolu a důkladným promícháním, následuje ochlazení po dobu alespoň 15 minut na -20° C.
