Nitrocelulózové membrány jsou oblíbenou matricí používanou při proteinovém blottingu kvůli jejich vysoké afinitě k vazbě proteinů, kompatibilitě s řadou detekčních metod (chemiluminiscence, chromogenní a fluorescence), a schopnost imobilizovat proteiny, glykoproteiny nebo nukleové kyseliny.
Proč používáme nitrocelulózu?
Nitrocelulózové sklíčko, nitrocelulózová membrána nebo nitrocelulózový papír je lepkavá membrána používaná pro imobilizaci nukleových kyselin v Southern blotech a Northern blotech Používá se také pro imobilizaci proteinů v západních bloty a mikroskopie atomové síly pro její nespecifickou afinitu k aminokyselinám.
Proč se PVDF používá ve Western blotting?
Western blotting pomocí polyvinylidendifluoridových (PVDF) membrán je jednou z nejpopulárnějších technik pro detekci a charakterizaci proteinů. Pokud je tato technika kombinována s imunodetekcí, lze chování konkrétního proteinu objasnit.
Je nitrocelulózová membrána hydrofobní?
Na rozdíl od polyakrylamidu poskytuje nitrocelulóza vhodnou podporu pro následné barvení proteinů nebo imunochemickou charakterizaci. Vazba na nitrocelulózu je převážně zprostředkována hydrofobní interakcí (Schneider, 1980), ačkoli mohou být zapojeny i elektrostatické síly (Farrah et al., 1981.
Co je lepší nitrocelulóza nebo PVDF?
Zatímco nitrocelulóza je křehká a křehká, PVDF je trvanlivější a má vyšší chemickou odolnost, díky čemuž je ideální pro aplikace resonding a sekvenování. Nitrocelulóza se může ukázat jako obtížné odizolovat a znovu sondovat bez ztráty signálu.
